芽孢杆菌 BC4 铬抗性相关基因 chrA 的克隆表达

中文关键词: 芽孢杆菌  chrA 基因  基因克隆与表达  重组菌株

中文摘要:

      以芽孢杆菌 BC4 菌株为对象，通过对其铬抗性相关基因 chrA 的克隆表达来测定其编码蛋白 ChrA 还原 Cr(VI)的能力以及该蛋白在芽孢杆菌 Cr(VI)去除中的作用，可帮助进一步阐明芽孢杆菌与 Cr(VI)的作用机理，并 为芽孢杆菌应用于铬污染治理奠定理论基础。PCR 扩增出芽孢杆菌 BC4 菌株铬抗性相关基因 chrA，PCR 产物经 克隆与测序，得到 chrA 完整的 DNA 序列。该序列大小为 1182bp，共编码 393 个氨基酸，预测编码蛋白分子量 为 43kDa。根据利用 NCBI 所进行的 BLAST 序列比对结果，判断该基因为铬转运蛋白编码基因。将 chrA 基因 PCR 产物双酶切后连接到表达载体 pET28b 并转化进大肠杆菌 BL21 中，对其表达产物进行分析。结果表明，chrA 基因在大肠杆菌 BL21 中表达约 43kDa 的蛋白，与预期结果相符；重组菌株对 Cr(VI)的耐受能力高于对照菌株， 说明 ChrA 蛋白在芽孢杆菌 BC4 的 Cr(VI)抗性机制中起重要作用，且重组菌株对 Cr(VI)具备较强的抗性。

英文摘要: